首先,先讓我們一起來了解一下什么是搖床的振幅以及氧氣傳遞效率,所謂的搖床振幅指的是托盤在做圓周運動時候的直徑,也被叫做振蕩直徑。而氧氣傳遞效率指的是氧氣從大氣中傳入到液體中的效率,一般用OTR表示,OTR越高,氧傳遞效率越高。
振幅和轉(zhuǎn)速的影響:
以上兩個因素都影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合,混合效果越好,氧傳遞速率就越好,遵循這些指導原則,可以選擇適合的振幅和轉(zhuǎn)速。一般來說,選擇25mm振幅可以作為萬能振幅應用于所有培養(yǎng),正因為如此,大多搖床的振幅都是25毫米。在一些應用中,如果對氧傳遞/細胞生長有特殊的限制,可能會選擇一些特殊的振幅。
在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因為培養(yǎng)量的增加會受到多個因素影響。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,那么無論其他因素有多好,培養(yǎng)量的增長都是有限的,或者可以這樣說,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時,振幅的正確選擇會得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會達到理想的培養(yǎng)量。
振幅和轉(zhuǎn)速都會對氧傳遞造成影響,如果在轉(zhuǎn)速很低(比如100rpm)的細胞培養(yǎng)中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達到最高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉(zhuǎn)速,托盤會適當?shù)钠胶廪D(zhuǎn)速。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長,一些對剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉(zhuǎn)速會導致培養(yǎng)物死亡。
其他影響因素:
1、裝液量:錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達到最大氧傳遞,裝液量不能超過10%。永遠不要將裝液量達到50%。
2、擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,擾流板都有效提高氧傳遞。有些廠家推薦使用“超高產(chǎn)量”培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會增大液體摩擦力,搖床可能會達不到最大設定轉(zhuǎn)速。